Calophyllum brasiliense extracts induced apoptosis in human breast adenocarcinoma cells

Resumo

A apoptose, ou morte celular programada, está ligada a diversos mecanismos de controle do crescimento celular. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a indução de apoptose em células de adenocarcinoma mamário humano MCF-7 por Calophyllum brasiliense . Os testes foram realizados em triplicata nos ensaios de apoptose e em sextuplicata nos ensaios de citotoxicidade, para cada grupo, e os dados foram expressos como média ± desvio padrão. Os valores de IC50 para citotoxicidade foram obtidos com base no ajuste da curva de regressão não linear. ANOVA de duas vias e o teste de Tukey foram aplicados nas análises de apoptose. O trabalho foi realizado no Centro de Pesquisa em Biodiversidade (Laboratório de Cultura Celular e Laboratório de Fitoquímica) e no Centro de Pesquisa (Laboratório de Biologia Molecular) da Universidade Paulista, entre janeiro de 2019 e dezembro de 2019. Dois extratos aquosos, obtidos do caule (STE) e das folhas (LFE) de Calophyllum brasiliense por maceração de 24 h, foram submetidos a um ensaio de citotoxicidade contra a linhagem celular de câncer de mama MCF-7 nas concentrações de 0,01 µg/ml, 0,1 µg/ml, 1,0 µg/ml, 10 µg/ml e 100 µg/ml. Também foram submetidos à avaliação da indução de morte celular por apoptose e necrose nas concentrações de 50, 100 e 200 µg/ml, após 6 h, 12 h e 24 h. A curcumina foi utilizada como droga de referência tanto para os ensaios de citotoxicidade (50 mM, 5,0 mM, 0,5 mM, 0,05 mM e 0,005 mM) quanto para os de apoptose/necrose (12,5 μM, 25 μM e 50 μM / 6 h, 12 h e 24 h). A apoptose e a necrose foram avaliadas por meio da utilização de anexina V e 7-AAD, em um citômetro de fluxo de dois canais. Em termos de atividade citotóxica, o extrato de Stenotrophomonas spp. (STE) (IC50 7,86 µg/ml) foi mais tóxico que o extrato de L. faeclocida (LFE) (IC50 74,35 µg/ml), e o IC50 da curcumina foi de 0,00159 µg/ml. O STE induziu 21,19% de apoptose e o LFE, 20,63%, em comparação com os 13,4% de indução de apoptose pela curcumina. Os resultados da indução de apoptose nas células cancerígenas foram obtidos após 24 horas, com concentração do extrato de 100 µg/ml. Ambos os extratos, STE e LFE, foram citotóxicos contra a linhagem celular de câncer de mama MCF-7 e induziram mais apoptose nas células MCF-7 do que a curcumina, sugerindo que são fontes potenciais de agentes indutores de apoptose de produtos naturais para uso contra células de adenocarcinoma de mama.