Vesículas extracelulares produzidas por células B-1 infectadas pelo Encephalitozoon cuniculi: análise ultraestructural e modulação do perfil de macrófagos

Resumo

As vesículas extracelulares (EVs) compreendem um grupo heterogêneo de vesículas limitadas por membrana carregadas com conteúdo proteico, lipídico e por ácidos nucléicos, sendo responsáveis por parte da comunicação celular. As células B-1 constituem um subtipo de linfócitos que produzem anticorpos naturais e grandes quantidades de IL-10. Contra o microsporídio Encephalitozoon cuniculi, a presença de células B-1 ou de fagócitos derivados de B-1 modulou o perfil de macrófagos para M1, com maior atividade microbicida e as células B-1 apresentavam muitas EVs, indicativo de que a comunicação entre as células poderia ser mediada pelas mesmas. Assim, o objetivo da presente investigação foi caracterizar ultraestruturalmente as EVs liberadas por células B-1 infectadas pelo E. cuniculi. Para tal, células B-1 foram obtidas de lavados peritoneais de camundongos Balb/c, enriquecidas em coluna magnéticas e infectadas (EVs Infected) ou não (EVs Uninfected) com E. cuniculi. As EVs e as células foram analisadas em relação ao tamanho, concentração, morfologia em microscopia eletrônica de transmissão e varredura. E. cuniculi determinou maior quantidade e diversidade de EVs produzidas por células B-1. As culturas mostraram células B-1, assim como B-1 cell-derivade phagocytes (B-1 CDP). Clusters de exossomos, também nomeados de vesículas intraluminais (ILVs), estavam envolvidos por uma membrana em continuidade à membrana plasmática das células B-1 caracterizavam as EVs conhecidas como carga multivesicular (MVC). O diâmetro médio das ILVs contidos pelos MVC foi de 68,5 ± 17,42 nm. Os migrassomos corresponderam aos clusters de exossomos localizados em projeção da membrana citoplasmática. Os ectossomos tinham origem por brotamentos da membrana plasmática. Os resultados permitiram demonstrar que as células B-1 produzem EVs de natureza diversificada incluindo exossomos, cargas multivesiculares e migrassomos, com expressivo aumento de produção causado pela infecção com E. cuniculi.