Influência da Glicose e da Linhagem Celular na Multiplicação de Esporos de Encephalitozoon cuniculi e E. intestinalis

Resumo

Microsporídios do gênero Encephalitozoon são patógenos intracelulares obrigatórios altamente dependentes do metabolismo da célula hospedeira, especialmente para obtenção de energia. Considerando as diferenças metabólicas na produção energética e utilização de glicose pelas células tumorais, este estudo teve como objetivo avaliar a multiplicação de E. cuniculi e E. intestinalis pela contagem de esporos em diferentes linhagens celulares tumorais cultivadas em condições de alta disponibilidade de glicose. Para isso, a linhagem RK-13 e as linhagens tumorais MCF-7, B16F10 e NCI-H292 foram cultivadas em meio RPMI suplementado com 5,5 mM ou 30 mM de glicose e infectadas com esporos nas proporções de 2:1, 4:1 e 6:1 (MOI 2, 4 e 6). Após 48 horas, a produção de esporos foi quantificada em câmara de Neubauer e a viabilidade celular avaliada. Os resultados demonstraram que a multiplicação de ambas as espécies foi influenciada de maneira dependente da linhagem celular, da concentração de glicose e da carga infecciosa. A suplementação com glicose promoveu aumento significativo da produção de esporos na linhagem H292, porém não reduziu a multiplicação de esporos no linhagem MCF-7. A linhagem MCF7 apresentou maior produção de esporos em condições basais de glicose, especialmente no MOI 2, sugerindo menor dependência de glicose elevada. As células RK13 apresentaram resposta dependente da espécie de microsporídio, com aumento do número de esporos de E. cuniculi e redução de E. intestinalis em meio enriquecido com glicose, indicando diferenças metabólicas entre os microsporídios. Já a linhagem B16F10 exibiu comportamento intermediário, com menor sensibilidade às variações de glicose e elevada taxa de necrose. Em relação ao número de esporos produzidos, o MOI 2 favoreceu consistentemente no aumento da produção de esporos, enquanto valores mais elevados não resultaram em aumento proporcional. A viabilidade celular manteve-se relativamente estável na maioria das condições e não se correlacionou diretamente com a produção de esporos. Além disso, foram observadas diferenças nos padrões de morte celular entre as linhagens, com maior necrose em B16F10, maior estabilidade em MCF7 e maior envolvimento de apoptose na linhagem H292, especialmente em condições de alta glicose. Em conjunto, os dados sugerem a multiplicação de esporos de E. cuniculi e E. intestinalis foi modulada tanto pela disponibilidade de glicose quanto pelas características metabólicas intrínsecas de cada linhagem celular. Esses resultados destacam a importância das condições metabólicas de cultivo para a compreensão das interações parasita-hospedeiro.