Expressão sérica de kit como um potencial marcador tumoral em mastocitomas cutâneos caninos
Anexos
Informações
Título
Expressão sérica de kit como um potencial marcador tumoral em mastocitomas cutâneos caninos
Autor(es)
Beatriz de Bem Kerr Martins
Orientador(es)
José Guilherme Xavier
Data de Defesa
19/12/2016
Resumo
O presente trabalho foi feito para estudar o potencial da expressão de RNAm de c-kit no soro de cães portadores de mastocitomas (MCT) como um marcador tumoral dessas neoplasias, utilizando a transcrição reversa e a reação em cadeia da polimerase quantitativa (RT-qPCR). O estudo foi realizado com 48 animais, sendo dez livres de neoplasia, usados como grupo controle, e 38 portadores de MCT. As amostras de sangue desses pacientes foram obtidas por punção venosa e criopreservadas em tubos contendo EDTA. O RNA total foi extraído, realizada a transcrição reversa do cDNA e a PCR quantitativa. O diagnóstico foi feito por citologia ou histopatologia, sendo nesses casos procedida a graduação e a pesquisa da imunoexpressão de KIT. O nível de transcrição de c-kit foi normalizado usando a expressão de β2- microglobulina, sendo a expressão relativa calculada pelo método ΔΔCT. A expressão de c-kit foi detectada em 72,9% das amostras, incluindo todas as amostras do grupo controle e 25 dos portadores MCT, tratados ou não, com superexpressão em 76% dos casos (p < 0,01,teste de Mann-Whitney). Nos seres humanos com mastocitoma os níveis de KIT, em particular, parecem refletir a extensão e a gravidade da doença. Neste trabalho observamos que a expressão e quantificação do c-kit no sangue periférico destes cães é um método promissor para identificar portadores de MCT, submetidos ou não à quimioterapia.
Resumo (EN)
The present work was carried out to study the potential of serum expression of KIT mRNA as a tumoral marker in mast cell tumor (MCT), using reverse transcription and quantitative polymerase chain reaction (RT-qPCR) on blood samples. This study was performed with 48 animals, 10 without tumoral disease and 38 dogs with MCT. Blood was obtained by venopuncture, and cryopreserved in tubes containing EDTA. The total RNA was extracted, reverse transcribed in cDNA and submitted to qPCR. Fifteen dogs underwent surgical excision of the tumor and the diagnosis of MCT was histologically confirmed, the lesions graduated and the immunoexpression of KIT evaluated. The level of KIT transcript was standardized using the expression of beta2-microglobulin, and the relative expression calculated by ∆∆CT method. The expression of KIT was detected in 72,9% of the samples, including all the control samples and 25 from MCT carriers, treated or not, with overexpression in 76% of the cases (p < 0,01, Mann-Whitney test). In humans with mastocytosis soluble KIT levels, in particular, seem to reflect the extent and severity of disease. Here we observed that peripheral blood KIT expression quantification is a promising method in order to identify MCT carriers, submitted or not to chemotherapy.
Tipo
Tese
Palavras-chave
Cães, KIT, Marcador Tumoral, Mastocitoma
Instituição
UNIP
Direito de Acesso
Acesso Aberto