Efeitos do medicamento homeopático Carcinosinum em adenocarcinoma mamário (4T1) in vitro
Anexos
Informações
Título
Efeitos do medicamento homeopático Carcinosinum em adenocarcinoma mamário (4T1) in vitro
Autor(es)
Thaís Cristina da Silva
Orientador(es)
Leoni Villano Bonamin
Data de Defesa
26/06/2019
Resumo
O medicamento Carcinosinum é um nosódio (medicamento homeopático preparado a partir de tecidos cancerosos) indicado como tratamento complementar em pacientes oncológicos. Na literatura científica há poucas publicações disponíveis sobre seu mecanismo de ação. O presente estudo teve como objetivo identificar possíveis alterações fenotípicas de células 4T1 (adenocarcinoma mamário murino) in vitro, incluindo viabilidade, expressão de HER-2 e potencial metastático, após tratamento com Carcinosinum em diferentes diluições homeopáticas (12cH; 30cH; 200cH), agitadas mecanicamente em água pura estéril a partir de uma matriz comercial. Todas as células tratadas foram cultivadas em meio R10, sendo a densidade celular de 1 x 105 células por garrafa pequena. Após 24 horas de tratamento, foi analisada a porcentagem de células em apoptose pela expressão de anexina V, sendo a contagem de células positivas feita de forma automatizada. A morfologia das células 4T1 foi avaliada a partir das colorações hematoxilina-eosina e Giemsa, enquanto a expressão de HER-2 foi avaliada por imunocitoquímica. O potencial metastático foi avaliado pela expressão e atividade de metaloproteinase 9 (MMP-9), por zimografia. O perfil de citocinas produzidas pelas células 4T1 foi estabelecido por Cytometric Bead Array (CBA). Os resultados obtidos sugerem que o tratamento de células 4T1 in vitro com Carcinosinum produz diversas alterações fenotípicas relacionadas ao desenvolvimento tumoral, na dependência da diluição utilizada, tais como: aumento do número de células positivas para anexina V (células em apoptose), hiperexpressão de HER-2 na membrana plasmática e diminuição da expressão de pró-MMP-9. Não foram observadas diferenças na produção de citocinas entre os tratamentos. Os dados apontam para diferentes efeitos do Carcinosinum no perfil fenotípico de células 4T1 in vitro. Contudo, estudos adicionais são necessários para a compreensão da importância desses achados na evolução clínica das neoplasias malignas.
Resumo (EN)
Carcinosinum is a nosode, a homeopathic medicine prepared from cancerous tissues, and is indicated as complementary treatment in cancer patients. There are few publications available in the scientific literature about its mechanism of action. The present study aimed to identify possible phenotypic changes of 4T1 cells (murine mammary adenocarcinoma) in vitro, including viability, HER-2 expression and metastatic potential, after treatment with Carcinosinum in different homeopathic dilutions (12cH, 30cH, 200cH), shaken mechanically in sterile pure water from a commercial matrix. All treated cells were cultured in R10 medium, the cell density being 1 x 105 cells per small flask. After 24 hours of treatment, the percentage of cells in apoptosis was analyzed by the expression of annexin V, being the counting of positive cells done in an automated way. The morphology of 4T1 cells was evaluated by hematoxylin-eosin and Giemsa staining, while HER-2 expression was assessed by immunocytochemistry. The metastatic potential was evaluated by expression and activity of metalloproteinase 9 (MMP-9), by zymography. The cytokine profile produced by the 4T1 cells was Essablished by Cytometric Bead Array (CBA). The results suggest that the treatment of 4T1 cells in vitro with Carcinosinum produces several phenotypic changes related to tumor development, depending on the dilution used, such as: increase in the number of annexin V-positive cells (apoptosis), hyperexpression of HER-2 on the plasma membrane and decreased expression of pro-MMP-9. There were no differences in cytokine production between treatments. The data point to different effects of Carcinosinum on the phenotypic profile of 4T1 cells in vitro, however, additional studies are needed to understand the importance of these findings in the clinical evolution of malignant neoplasms.
Tipo
Dissertação
Palavras-chave
Carcinosinum, Células 4T1, Homeopatia, Câncer de Mama
Grupo de Pesquisa da UNIP cadastrado no CNPq
Biologia da diferenciação e transformação celulares: modulação por fatores endógenos e exógenos
Instituição
UNIP
Direito de Acesso
Acesso Aberto