Efeitos do cloreto de sódio 30ch na bio-resiliência de artemia franciscana ao stress hiposmótico: rastreabilidade e expressão de proteínas de choque térmico
Documento
Informações
Título
Efeitos do cloreto de sódio 30ch na bio-resiliência de artemia franciscana ao stress hiposmótico: rastreabilidade e expressão de proteínas de choque térmico
Autor(es)
Andreia Adelaide Gordinho Pinto
Orientador(es)
Leoni Villano Bonamin
Data de Defesa
11/06/2024
Resumo
Introdução: Nesse estudo, a Artemia franciscana e o isoterápico de cloreto de sódio foram utilizados como modelos experimentais para avaliação da bio-resiliência de embriões ao stress hiposmótico, com enfoque para a possibilidade de rastreamento do isoterápico na água e a expressão de genes para proteínas de choque térmico (HSPs) como marcadores moleculares. Objetivo: Estudar os mecanismos de biorresiliência de Artemia franciscana ao stress hiposmótico após tratamento com cloreto de sódio (NaCl) 30CH e identificar sua presença na água pelo método de corantes solvatocrômicos. Métodos: Os experimentos foram realizados nas fases da lua cheia e minguante em cego. Utilizadas placas de cultura de 96 poços para observar a eclosão de cistos de Artemia franciscana, imersos em água pura ou água do mar artificial. Em estudo piloto foi feita a padronização do stress hiposmótico e a escolha da potência de NaCl entre 6CH e 200CH. Os controles foram água, água sucussionada, etanol 10% e etanol 10% sucussionado. Cistos expostos à água pura e tratados ou não com NaCl 30CH foram avaliados quanto à taxa de eclosão, vitalidade dos náuplios e expressão de genes-alvo para HSPs. Foi realizado um screening de 6 corantes solvatocrômicos para a seleção de um marcador físico-químico capaz de identificar a presença de NaCl 30CH na água. Dados analisados por ANOVA de duas vias, seguida de Tukey, sendo α<0,05. Resultados: O tratamento dos cistos com NaCl 30CH facilitou a interrupção da eclosão no estágio guarda-chuva e a expressão reduzida dos genes hsp26 e hsp90. Os corantes BDN e Coumarin 7 mostraram ser bons marcadores físico-químicos para o rastreamento do NaCl 30CH e Coumarin 7 foi escolhido para sua identificação na água. Discussão: O fato de os cistos permanecerem em estágio "guarda-chuva" em maior proporção e a menor expressão de p26 e hsp90 após o tratamento com NaCl 30CH sugere facilitação dos processos de interrupção do ciclo de vida dos animais expostos a condições ambientais incompatíveis com a espécie (stress hiposmótico severo), com possível impacto para toda a cadeia trófica em situações de vida real. O NaCl 30CH foi possível de ser rastreado na água pelo corante Coumarin 7. Conclusão: Houve facilitação da interrupção do desenvolvimento embrionário pelo NaCl 30CH em situações de alto risco para a espécie, sendo tal potência homeopática rastreável na água por corantes solvatocrômicos.
Resumo (EN)
Introduction: In this study, Artemia franciscana and sodium chloride isotherapeutic were used as experimental models to evaluate the bio-resilience of embryos to hypoosmotic stress, focusing on the possibility of tracking the isotherapeutic in water and the expression of genes for heat shock proteins (HSPs) as molecular markers. Objective: To study the bioresilience mechanisms of Artemia franciscana to hypoosmotic stress after treatment with sodium chloride (NaCl) 30CH and identify its presence in water using the solvatochromic dye method. Methods: The experiments were carried out in the full and waning moon phases, in blind. The 96-well culture plates were used to observe Artemia franciscana cysts hatching when immersed in pure water or artificial seawater. In a pilot study, NaCl 30CH was chosen from a screening of potencies between 6CH and 200CH under severe hypoosmotic stress. Controls were water, succussion water, 10% ethanol, and 10% succussion ethanol. Cysts exposed to pure water and treated or not with NaCl 30CH were evaluated for hatching rate, nauplii vitality, and expression of HSPs target genes. Six solvatochromic dyes were screened to select a physicochemical marker capable of identifying the presence of NaCl 30CH in water. Data were analyzed by two-way ANOVA followed by Tukey, with α<0.05. Results: Treatment of cysts with NaCl 30CH facilitated the arrest of hatching at the umbrella stage and reduced the hsp26 and hsp90 gene expression. The BDN and Coumarin 7 dyes were good physicochemical markers for tracking NaCl 30CH, and Coumarin 7 was chosen to track it in water. Discussion: The fact that the cysts remain in the "umbrella" stage in a greater proportion and the lower expression of p26 and hsp90 after treatment with NaCl 30CH suggests facilitation of interrupting the life cycle process in animals exposed to environmental conditions incompatible with the species (severe hypoosmotic stress), with possible impact on the entire trophic chain in real-life situations. NaCl 30CH was able to be traced in water by the dye Coumarin 7. Conclusion: The interruption of embryonic development was facilitated by NaCl 30CH in situations of high risk for the species, with such homeopathic potency being traceable in water by solvatochromic dyes.
Tipo
Tese
Palavras-chave
homeopatia, diapausa, camarão das salmouras, ecotoxicologia, corantes solvatocrômicos.
Publicado em
PINTO, A. A. G.; BONAMIN, L. V. (Orientador). Efeitos do cloreto de sódio 30ch na bio-resiliência de artemia franciscana ao stress hiposmótico: rastreabilidade e expressão de proteínas de choque térmico. 2024. Tese (Doutorado em Patologia Ambiental e Experimental) - Universidade Paulista, São Paulo, 2024.
Área de Concentração
Patologia Ambiental e Experimental
Linha de Pesquisa
Ecotoxicologia e Inovações Terapêuticas
Instituição
Universidade Paulista
Direito de Acesso
Acesso Aberto
Financiamento
Programa de Suporte à Pós-Graduação de Instituições de Ensino Particulares – PROSUP/CAPES.