Efeitos da timulina 5cH na lesão granulomatosa induzida por BCG: participação de células B-1

Resumo

Em estudos anteriores, constatou-se que a timulina (hormônio tímico), quando preparada homeopaticamente na potência 5cH, tem a propriedade de melhorar a performance produtiva em um galpão de frangos de corte infectados por reovírus, e modular o desenvolvimento do tumor de Ehrlich e de lesões inflamatórias granulomatosas em camundongos, por meio de mecanismos imunomediados. O presente trabalho teve como finalidade estudar amiúde os mecanismos imunomoduladores da timulina 5cH no modelo experimental granulomatoso induzido por BCG em camundongos, com especial enfoque para células B-1 e para a participação do zinco no processo imunomodulatório. Para isso, três grupos de camundongos Balb/c, SPF, machos (grupo A tratado com timulina 5cH, grupo B tratado com timulina 5cH + Chelex e grupo C controle tratado com o veículo) foram inoculados com BCG no coxim plantar esquerdo, e tanto o granuloma subcutâneo quanto o baço foram colhidos para avaliação histomorfométrica dos macrófagos presentes, por meio de fixação, inclusão em parafina e coloração por HE, Azul da Prússia e Ziehl-Neelsen. A citometria de fluxo foi utilizada para caracterizar e quantificar as células presentes no peritônio do camundongo. Nesse caso, foi feita a quantificação de células positivas para CD11b (fagócitos ativados, células B-1), CD19 (células B-1 e B-2), CD23 (negativo nas células B-1, positivo nas células B-2) e CD5 (células B-1a), presentes no lavado peritoneal. A análise estatística foi feita utilizando o teste de Kruskal – Wallis/Dunn para avaliações não paramétricas, e o teste Anova/Tuckey-Krammer para as paramétricas. O método do X2 foi utilizado para avaliação da contagem celular em citometria de fluxo. Os valores de p≤0,05 foram considerados estatisticamente significantes. Os resultados mostraram que a timulina 5cH induziu aumento do edema na lesão 7 e 21 dias após a inoculação do BCG e aumento da área folicular do baço. A citometria demonstra progressivo aumento de células derivadas de monócitos e diminuição de fagócitos derivados de B-1 na cavidade peritoneal em função do tempo; entretanto, camundongos tratados com timulina 5cH apresentam clara persistência de fagócitos derivados de B-1 no peritôneo aos 21 dias. Ao mesmo tempo, o escore de macrófagos infectados no granuloma diminui significativamente, indicando remissão da infecção. Dessa forma, conclui-se que a timulina 5cH modula o processo granulomatoso induzido por BCG, por meio de mecanismos imunopatológicos relacionados com a diferenciação de células B-1 em fagócitos na cavidade peritoneal do camundongo. O tratamento da amostra com Chelex permite descartar a hipótese de efeito inespecífico da timulina 5cH por contaminação de Zn em concentrações imunomoduladoras.