Crotoxina induz o inflamassoma NLRP3 e resposta inflamatória Th1 e Th17 contra a encefalitozoonose experimental em camundongos.

Resumo

Encephalitozoon cuniculi são fungos atípicos, oportunistas, intracelulares obrigatórios que infectam hospedeiros vertebrados e que possuem extrema habilidade de manipular a resposta imune e sobreviver no hospedeiro. A crotoxina (CTX), bioativo isolado do veneno da serpente Crotalus durissus terrificus, demonstra capacidade de modificar a reposta imune. Macrófagos desafiados com E. cuniculi e tratados com CTX apresentaram maior atividade microbicida e perfil M1, revertendo o predomínio do perfil M2 provocado pelo patógeno. O objetivo do presente trabalho foi avaliar os efeitos da CTX sobre a resposta imune desenvolvida na infecção pelo E. cuniculi em camundongos. Para tal, camundongos imunossuprimidos com ciclofosfamida (Cy) foram infectados com esporos de E. cuniculi e após 7 dias tratados com uma dose CTX. Aos 14 dias de infecção foi realizada a eutanásia dos animais, seguida da análise de citocinas Th1, Th2 e Th17 no plasma, quantificação fenotípica de macrófagos e linfócitos no lavado peritoneal e no baço, análise histopatológica e mensuração da carga fúngica no fígado, e quantificação das expressões de mRNA para o inflamassoma NLRP3 em leucócitos circulantes. Conforme esperado, a Cy reduziu as populações de macrófagos e linfócitos. Contudo, camundongos infectados com E. cuniculi e tratados com CTX tinham maior perfil de citocinas inflamatórias Th1 e Th17, ativação do inflamassoma NLRP3 e os linfócitos T CD4 e T CD8 tinham aumento da expressão de IFN-γ associados a redução da carga fúngica. Ao contrário, nos camundongos não tratados com CTX, a infecção resultou em maior perda de peso, aumento apenas de citocinas Th1, baixa expressão do inflamassoma NLRP3 e menor expressão de IFN-γ em os linfócitos T CD4 e T CD8. Concluímos que o tratamento com CTX modulou a resposta imune para um perfil mais pró-inflamatório, com atividade demonstrada do inflamassoma NLRP3 ativado, resultando em maior atividade microbicida contra E. cuniculi em camundongos imunossuprimidos com Cy e infectados.