Análise de metilação de elementos LINE-1 em mastocitomas caninos

Resumo

Epigenética é o estudo das mudanças na função dos genes que são herdáveis meioticamente ou mitoticamente, porém sem implicar na mudança do DNA. Os elementos LINE-1 representam um tipo de sequência repetitiva que está dispersa ao longo de todo o genoma, sendo o estudo do seu padrão de metilação utilizado na compreensão de diversas neoplasias. O mastocitoma canino é uma neoplasia cutânea frequente na prática veterinária e apresenta diferentes graus de malignidade, sendo classificado por alguns pesquisadores de acordo com a sua diferenciação histológica. Tendo em vista a atual escassez científica em relação ao padrão epigenético das neoplasias nos animais domésticos, este estudo propõe verificar se há correlação entre o padrão de metilação dos elementos LINE-1 com os diferentes estadiamentos do mastocitoma canino de acordo com Kiupel. Para realização de tal estudo, foram extraídos DNA e RNA de fragmentos neoplásicos parafinados pelos métodos fenol/clorofórmio/alcool isoamílico e TRIzol® respectivamente. O padrão de metilação e expressão gênica de LINE-1 foram quantificados por qPCR. Foi observada maior expressão gênica de LINE-1 nas neoplasias caracterizadas com maior grau de malignidade, em comparação ao tecido saudável e as neoplasias com menor grau de malignidade. Observou-se hipometilação da região promotora do LINE-1 em ambas as classificações neoplásicas do mastocitoma, se comparadas ao tecido saudável analisado. As neoplasias classificadas como de maior malignidade, apresentam tanto maior expressão gênica de LINE-1 como menor grau de metilação da região promotora, evidenciando o potencial uso do LINE-1 como biomarcador de instabilidade genômica.