Environmental surveillance of Cryptosporidium and Giardia in surface supply water and treated sewage intended for reuse from an urban area in Brazil

O monitoramento ambiental de protozoários, com potencial para desencadear doenças, é essencial para a tomada de decisões pelas autoridades gestoras e para o controle da vigilância hídrica. Este estudo teve como objetivo detectar e quantificar oocistos de Cryptosporidium e cistos de Giardia em águas superficiais destinadas ao abastecimento de água potável e em efluentes tratados para reúso na cidade de São Paulo. As amostras, coletadas bimestralmente durante um ano, foram concentradas utilizando os métodos USEPA 1623.1 e 1693 para águas superficiais e efluentes tratados, respectivamente. Técnicas de imunofluorescência e amplificação de ácidos nucleicos foram utilizadas para detectar e quantificar (oo)cistos. A técnica de clonagem, seguida de sequenciamento e análises filogenéticas, foi realizada para caracterizar espécies e genótipos. A imunofluorescência detectou Cryptosporidium spp. e Giardia spp. Em 69,2% (9/13) e 100% (13/13) das amostras de água superficial (0,1-41 oocistos/L e 7,2-354 cistos/L, respectivamente). Nas amostras de água reutilizada, 85,7% (12/14) foram positivas para ambos os protozoários, com concentrações variando de 0,4 a 100,6 oocistos/L e de 1,2 a 93,5 cistos/L. Os ensaios de qPCR mostraram que 100% das amostras de água superficial (0,1-14,6 oocistos/L e 0,3-639,8 cistos/L) e das amostras de água reutilizada (0,1-26,6 oocistos/L e 0,3-92,5 cistos/L) foram positivas para ambos os protozoários. As espécies C. parvum, C. hominis e C. muris foram identificadas utilizando o gene 18S rRNA, demonstrando a presença de espécies antroponóticas e zoonóticas nas amostras. Análises multilocus do rRNA SSU, dos genes tpi e gdh de Giardia intestinalis identificaram os genótipos AII, BII e BIV, revelando que a contaminação nas diferentes matrizes provém de isolados humanos. O estudo demonstrou a circulação desses protozoários na região metropolitana de São Paulo e o comprometimento do abastecimento de água superficial em áreas metropolitanas impactadas pelo lançamento de esgoto não tratado ou tratado inadequadamente, no que diz respeito à remoção dos protozoários, enfatizando a necessidade de implementação de políticas de segurança hídrica para prevenir a disseminação desses protozoários na população.