Crotoxin modulates Encephalitozoon cuniculi-infected macrophages toward the M1 microbicidal profile

Resumo

A crotoxina (CTX), um composto bioativo extraído da serpente Crotalus durissus terrificus, apresenta propriedades antibacterianas, antitumorais e anti-inflamatórias. Os microsporídios são fungos oportunistas, parasitas intracelulares obrigatórios, que infectam vertebrados e invertebrados e apresentam elevada resistência aos fármacos convencionais. Além disso, esses microrganismos são capazes de subverter a atividade microbicida dos macrófagos com perfil M1, induzindo sua polarização para o perfil M2, mais favorável à sobrevivência do patógeno. Dessa forma, neste estudo, foram avaliados os efeitos da CTX sobre a viabilidade dos esporos do microsporídio Encephalitozoon cuniculi, bem como sobre a atividade microbicida de macrófagos in vitro. Os esporos de E. cuniculi foram tratados com duas concentrações de CTX (2,4 e 4,8 μg/mL) e cultivados em células RK-13 para análise de viabilidade. Adicionalmente, células aderentes peritoneais (APerC), obtidas a partir de lavados peritoneais de camundongos BALB/c, foram infectadas com esporos de E. cuniculi por 1 hora e tratadas com CTX durante 3 horas. Em seguida, foram avaliados o perfil dos macrófagos, a produção de citocinas, a viabilidade dos macrófagos e a capacidade proliferativa dos esporos. O tratamento dos esporos de E. cuniculi com CTX não apresentou efeito fungicida nem fungistático. Em comparação aos macrófagos do grupo controle, os macrófagos infectados por E. cuniculi e tratados com 2,4 μg/mL de CTX apresentaram aumento da polarização para o perfil M1, maior ocorrência de necrose e maior produção das citocinas TNF-α e IL-6. Além disso, os esporos obtidos desses macrófagos apresentaram redução da capacidade proliferativa.