Interstitial pneumonia via the oropharyngeal route of infection with Encephalitozoon cuniculi

Resumo

Microsporídios causam infecções oportunistas em indivíduos imunossuprimidos. Mamíferos eliminam esses esporos de fungos nas fezes, urina ou secreções respiratórias, que podem contaminar água e alimentos, chegando assim ao corpo humano e causando infecção. A via oral é a mais comum, embora experimentos tenham demonstrado que as vias intraperitoneal e intravenosa também podem disseminar a infecção. A infecção do trato respiratório, embora considerada possível, não foi relatada até o momento. O presente estudo, portanto, teve como objetivo demonstrar a infecção pelo microsporídio Encephalitozoon cuniculi pela via orofaríngea como modelo para pneumonia oportunista. Os objetivos foram o estudo da pneumonia oportunista em geral, confirmando também a transmissão pela via respiratória para ampliar a compreensão da epidemiologia das zoonoses. Camundongos C57BL, machos e fêmeas, com até 12 semanas de idade e livres de patógenos específicos (SPF), foram inoculados (grupo Infectado) ou não infectados (grupo Não Infectado) com 1 × 10⁷ esporos de E. cuniculi pela via orofaríngea. Os animais imunossuprimidos com ciclofosfamida (Cy) foram infectados (grupo Cy-Infectado) ou não infectados (grupo Cy-Não Infectado) e, em seguida, avaliou-se a influência da imunossupressão na infecção. Em ambos os grupos, animais inoculados com solução salina a 0,9% pela via orofaríngea serviram como controles (grupos Sham e Cy-Sham, respectivamente). Após 14 dias de infecção, os pulmões de todos os animais foram coletados para análise histopatológica, fenotipagem de células inflamatórias pulmonares por citometria de fluxo, mensuração da carga fúngica por qPCR e mensuração dos níveis séricos de citocinas Th1, Th2 e Th17. Os resultados revelaram que os animais infectados desenvolveram pneumonia intersticial caracterizada por lesões infiltrativas inflamatórias perialveolares com predominância de linfócitos e plasmócitos. No entanto, a carga fúngica e a extensão do infiltrado inflamatório foram relativamente menores no grupo infectado com ciclofosfamida (Cy-Infected), com predominância da população de linfócitos T CD8+ nos pulmões em comparação ao grupo infectado. No grupo infectado não tratado com Cy, observou-se um aumento na população de macrófagos alveolares (F4/80+CD11b-SiglecF+), juntamente com maior carga fúngica e infiltrado inflamatório nos pulmões, indicando uma pneumonia por Encephalitozoon mais acentuada em comparação aos animais imunossuprimidos. Os grupos infectados apresentaram perfis de citocinas Th1, com o grupo Cy-Infected exibindo níveis aumentados de Th17. Em conjunto, esses resultados demonstraram que a infecção orofaríngea promoveu pneumonia causada por E. cuniculi em camundongos tratados ou não com ciclofosfamida, com maior gravidade ocorrendo nos camundongos não imunossuprimidos, estabelecendo assim esse modelo como adequado para pneumonia intersticial por aspiração.