Identificação da Fração Ativa e Perfil Cromatográfico de Extrato Vegetal com Ação Antimicrobiana: Dioscorea altissima

Resumo

A pesquisa teve como objetivo identificar a fração ativa e obter o perfil cromatográfico do extrato Dioscorea altissima (Dioscoreaceae), previamente apontado por sua potencial ação antimicrobiana contra bactérias envolvidas na cárie dentária. Material e método: Os extratos foram preparados a 100mg/ml e diluídos entre 1% e 10%. O solvente foi evaporado antes da aplicação do meio de cultura ser inoculado sobre o cromatograma. Para a difusão em ioautografia, utilizou-se Streptococcus mutans (ATCC 25175) a 1,5 × 108 UFC/ml em meio Brain Heart Infusion Agar (BHIA). Foram aplicados 10 μL da amostra em placas de sílica de 5 cm × 5 cm, posteriormente colocadas sobre meio ágar inoculado. Após gelificação, as placas foram incubadas a 36oC por 48h e submetidos ao reagente MTT para análise dos halos de inibição. Os experimentos foram realizados três vezes de forma independente e comparados com clorexidina 1%. (CHX 1%). Para a obtenção do perfil químico, o extrato foi analisado por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas. A amostra foi dissolvida em acetona (4 mg/mL) e injetada (1 μL) em uma coluna capilar, e a detecção foi realizada por ionização (70eV), com identificação dos compostos baseado em padrões comerciais e na biblioteca NIST 2.0. Os tamanhos dos halos foram medidos com paquímetro eletrônico. Após a verificação da normalidade de Shapiro-Wilk e da homocedasticidade dos dados, premissas para o teste- t, optou-se por realizar o teste t. Foi utilizado o teste de ROUT (Q=5%) para verificar a existência de outliers. Para todos os ensaios, foi adotado p<0,05 de significância. Resultados: Em dois dos três experimentos a CHX 1% teve melhor desempenho (p<0,0001). No segundo experimento, porém, não houve diferença significativa entre o extrato e a CHX 1% (p=0,1037). A análise química revelou substâncias como o p-vinilguaiacol e o neofitadieno, que podem contribuir para a sua ação antimicrobiana. Conclusão: O extrato de Dioscorea altissima demonstrou potencial antimicrobiano promissor, comparado ao da clorexidina, o que justifica o aprofundamento dos estudos para identificação das substâncias ativas responsáveis por esse efeito. O perfil químico do extrato mostrou componentes que podem ser os responsáveis pela ação antimicrobiana do extrato. Novos estudos com vistas à purificação do extrato devem ser delineados a partir do resultado deste estudo.