Efeito do resveratrol no controle da progressão da osteonecrose associada ao uso de zoledronato: estudo em ratas ovariectomizadas

Resumo

Este estudo teve como objetivo verificar o efeito do resveratrol (RESV) na ocorrência e severidade da osteonecrose dos maxilares (ONM) em ratas com deficiência de estrogênio tratadas com zoledronato (ZLD). Para tanto, foram utilizados 50 ratas Wistar adultas distribuídas nos seguintes grupos: (1) OVT+RESV (n:10): ovariectomia + resveratrol; (2) OVT+PLA (n:10): ovariectomia + placebo; (3) OVT+ZLD (n:10): ovariectomia + zoledronato, (4) OVT+RESV+ZLD (n:10): ovariectomia + resveratrol + zoledronato, (5) SHAM+PLAC (n:10): animais não ovariectomizados + placebo. A ONM foi induzida por meio da exodontia dos primeiros e segundos molares inferiores bilateralmente. Após a eutanásia, as mandíbulas foram fotografadas para análise clínico-macroscópica da ONM. Adicionalmente, as hemi-mandíbulas esquerdas foram inicialmente submetidas à microtomografia computadorizada [volume ósseo (BV/TV - %), espessura de trabéculas (Tb.Th - mm²), número de trabéculas (Tb.N - mm²) e separação entre as trabéculas (Tb.Sp - mm)] e, posteriormente, à análise histomorfométrica quanto à porcentagem de osso neo-formado (TONF) e não vital (TONV) e imuno-histoquímica (TRAP, RANKL e OPG). As hemi-mandíbulas direitas foram coletadas para análise da expressão gênica [DEAD-box helicase 5 (Ddx5), Tartrate-resistant acid phosphatase 5b (TRACP 5b), osteprotegerin (OPG), Receptor activator of nuclear factor kappa-Β ligand (RANKL), β-catenina, superoxide dismutase 1 (SOD1) e glutathione-disulfide reductase (GSH)]. O sangue dos animais também foi coletado para análise sérica de Telopeptídeo Carboxiterminal do Colágeno Tipo I (CTX), por meio de Elisa. Os dados foram submetidos à análise estatística por meio dos testes ANOVA/Tukey ou Kruskal Wallis/Dunn, com nível de significância de 5%. A análise de micro-CT revelou menor BV/TV e menor Tb.Th no grupo OVT+PLAC, em relação aos demais grupos (p<0.05). Além disso, esse grupo apresentou maior Tb.Sp ao ser comparado com os grupos tratados com zoledronatro e ao grupo não ovariectomizado (p<0.05). O grupo OVT+RESV também teve menor BV/TV e menor Tb.Th quando comparado aos grupos que receberam zoledronado e ao grupo SHAM+PLAC (p<0.05). O zoledronato aumentou o Tb.N, comparando-se com os grupos que não receberam o zoledronato (p<0.05). Considerando-se a análise histomorfométrica, o zoledronato aumentou a porcentagem de TONV e reduziu a porcentagem de TONF em relação aos grupos que não receberam zoledronato (p<0.05). Adicionalmente, o grupo que recebeu resveratrol isoladamente teve maiores valores de TONF quando comparado ao grupo OVT+ZLD+PLAC (p<0.05). Na análise imuno-histoquímica, observou-se aumento na quantidade de células TRAP-positivas na presença do zolendronato (p<0.05). Já a análise da expressão gênica mostrou que o zoledronato aumentou os níveis de mRNA de TRAP em relação aos demais grupos (p<0.05). O tratamento com resveratrol elevou os níveis de SOD quando comparados a OVT+ZLD+PLAC e OVT+ZLD+RESV (p<0.05). Em relação aos níveis séricos de CTX, o grupo OVT+PLAC apresentou maiores níveis de CTX comparando-se a OVT+ZLD+PLAC, OVT+ZLD+RESV e SHAM+PLAC (p<0.05). Pode-se concluir que o resveratrol é capaz de reduzir a osteonecrose induzida por medicação.