Efeito da terapia fotodinâmica antimicrobiana sobre lesões de cárie em dentina induzida em modelo animal
Anexos
Informações
Título
Efeito da terapia fotodinâmica antimicrobiana sobre lesões de cárie em dentina induzida em modelo animal
Autor(es)
Maria Eugenia Zanata Milleo
Orientador(es)
Cintia Helena Coury Saraceni
Data de Defesa
20/02/2019
Resumo (EN)
The aim of this work was to evaluate the effect of PDT on the microbial reduction of caries lesions in dentin, induced in animal models. Two adult Wistar rats (Rattus novergicus), (1 female and 1 male), 6 to 9 weeks old, were prepared for breeding, resulting in twelve cubs. After their weaning period (ntotal = 12) the caries induction process was initiated by the inoculation of Streptococcus mutans with swabs in the oral cavity of the animals for 3 consecutive days and 5 days after that period, new samples of the oral cavity were collected with the objective of verifying the presence of the bacterium by means of RT-PCR. Once confirmed, a cariogenic diet was started with 56% sucrose feed and 10% sucrose ad libitum water for 4 weeks, moment when the caries score attribution was carried out to the lower molars, according to ICDAS, by two duly calibrated examiners (Kappa=0.85). From the finding of dentin impairment, cavitation of 1 mm depth with a 1011 diamond-tip bur was performed in high rotation, in order to serve as niches for the dye and the PDT application. The animals were randomly divided into two groups (n=6) according to the treatment: dye group: methylene blue gel at 100 mg/L concentration for five minutes; PDT group: methylene blue gel at 100 mg/L concentration for five minutes, followed by low intensity laser irradiation, 660 nm – 40 mw - 60 J/cm² - 1 min - 0.04 cm². Dental tissue samples were collected pre- and after-treatment with swabs for RT-PCR analysis. Upon treatment conclusion, the animals were euthanized, their jaws were extracted for SEM analysis of the molars. Use of the statistical model of generalized estimated equations (GEE). The results demonstrated that, regardless of the treatment, there was a significant reduction of Streptococcus mutans over time, with a two-fold reduction for the PDT group (p <0.05). From the obtained results it can be concluded that the photodynamic therapy was effective in the microbial reduction of lesions produced in animal models and also that such model was able to accurately and replicate the lesions of caries in dentin.
Resumo
O objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito da PDT na redução microbiana de lesões de cárie em dentina, induzidas em modelo animal. Foram utilizados 2 ratos, 1 fêmea e 1 macho, Wistar (Rattus novergicus) adultos, com 6 a 9 semanas de vida, que foram preparados para reprodução. Após o desmame (ntotal = 12), os filhotes foram separados da mãe e procedeu-se ao processo de indução de cárie, iniciado pela inoculação de S. Mutans por meio de SWAB na cavidade oral dos animais. A inoculação foi realizada por 3 dias consecutivos e, 5 dias após esse período, novas coletas da cavidade oral foram realizadas a fim de se constatar a presença da bactéria, por meio de PCR-real time. Uma vez comprovada, iniciou-se dieta cariogênica com ração 56% de sacarose na ração e água com 10% de sacarose ad libitum, por 4 semanas. Após esse período, foi realizada a atribuição dos escores de cárie nos molares inferiores, segundo ICDAS, por dois examinadores devidamente calibrados (KAPPA = 0,85). A partir da constatação de comprometimento de dentina, foi realizada cavitação de 1 mm de profundidade, com ponta diamantada 1011, em alta rotação, a fim de servir de nicho para a aplicação do corante e PDT. Os animais foram, então, divididos aleatoriamente em dois grupos (n=6), segundo o tratamento realizado: grupo corante: azul de metileno gel em concentração 100 mg/L, por cinco minutos; grupo PDT: azul de metileno, 100 mg/L, por 5 minutos, seguido de irradiação com laser de baixa intensidade, 660nm - 40mw – 60 J/cm² - 1min – 0,04cm². Coletas de tecido dental foram realizadas pré e pós-tratamentos por meio de SWABs, para análise em PCR-real time. Após o término do experimento, os animais foram eutanasiados, as mandíbulas foram extraídas para análise em MEV dos molares. Utilizou-se o modelo estatístico de equações estimadas generalizadas (GEE). Os resultados demonstraram que independente do tratamento houve uma redução significativa de S. Mutans ao longo do tempo, com redução duas vezes maior para o grupo PDT (p<0,05). A partir dos resultados obtidos, pode-se concluir que a terapia fotodinâmica foi eficaz na redução microbiana das lesões de cárie em dentina produzidas em modelo animal, podendo ser um tratamento adjuvante para essas lesões.
Tipo
Dissertação
Palavras-chave
Terapia Fotodinâmica, Cárie, Dentina, Modelo Animal
Grupo de Pesquisa da UNIP cadastrado no CNPq
Aplicação de laser na área da saúde
Instituição
UNIP
Direito de Acesso
Acesso Aberto