Assinatura metabolômica salivar em crianças com Síndrome Congênita do Zika Vírus; aspectos clínicos, metabólicos e de saúde bucal.

Avaliar o perfil metabolômico salivar de crianças com síndrome congênita do Zika vírus (SCZV) e investigar alterações metabólicas associadas à doença. Material e Métodos: Trata-se de um estudo observacional, analítico, transversal e quantitativo, no qual foram analisadas amostras de saliva total não estimulada de crianças com idade entre 3 e 10 anos, sendo 52 com SCZV (G1) e 60 neurotípicas (G2). Foram coletados dados clínicos, sistêmicos e de saúde bucal, incluindo experiência e severidade de cárie (CPOD, ceod e CAST), presença de biofilme dentário, pH e fluxo salivar. Para todas as analises estatísticas foram desenvolvidos modelos próprios para cada necessidade. As amostras salivares foram coletadas no período matutino, sob jejum prévio, e centrifugadas a 10.000 × g, a 4 °C, por 1 hora. Para o preparo das amostras destinadas à análise metabolômica, foram utilizados 540 µL de sobrenadante salivar e 60 µL de tampão fosfato (pH 7,0), contendo D₂O e DSS como referência de deslocamento químico. Os espectros de ¹H-RMN foram adquiridos em espectrômetro Bruker Avance III de 500 MHz, utilizando a sequência de pulsos ZGPR com presaturação para supressão do sinal da água. Os espectros foram processados no software TopSpin (Bruker BioSpin), incluindo correção de fase e linha de base. Os dados metabolômicos foram extraídos dos espectros utilizando o software AMIX (Bruker BioSpin), por meio da integração em intervalos espectrais de 0,03 ppm. A identificação dos metabólitos foi realizada pela comparação dos deslocamentos químicos e padrões espectrais com o Human Metabolome Database (HMDB). Os dados foram normalizados e submetidos ao escalonamento de Pareto. As análises estatísticas foram realizadas no MetaboAnalyst 5.0, empregando análises multivariadas por PCA e PLS-DA, com seleção das variáveis discriminatórias pelo VIP SCORE e análise univariada pelo teste t de Student, com correção FDR 0,001. Resultados: Nos três modelos multivariados de regressão linear avaliados, tendo como desfechos os índices CAST, CPOD e ceod, o biofilme e o fluxo salivar não apresentaram associação estatisticamente significativa. Entretanto, os modelos foram globalmente significativos pela ANOVA (p < 0,001). O modelo referente ao CAST apresentou a maior capacidade explicativa (R² = 62,7%), seguido pelos modelos ceod (R² = 47,5%) e CPOD (R² = 37,4%), indicando diferentes proporções da variabilidade dos respectivos desfechos explicadas pelas variáveis incluídas em cada modelo.A análise de componentes principais (PCA) evidenciou separação do perfil metabolômico entre os grupos, com PC1 e PC2 explicando conjuntamente 51,4% da variabilidade total, sendo observada diferença significativa no PC1 (p = 0,001). O modelo PLS-DA apresentou acurácia de 84,50%, R² de 77,15% e Q² de 50,25%. O G1 apresentou níveis aumentados de alanina, aminobutirato, arginina, fenilalanina, glicina, glicose, lactato, leucina, regiões de açúcares, succinato, tirosina, valina e N-acetilsugar, enquanto acetato, etanol e propionato apresentaram níveis reduzidos. O acetato apresentou a maior capacidade discriminatória entre os grupos. Conclusão: Crianças com SCZV apresentaram perfil metabolômico salivar distinto em relação às crianças neurotípicas, caracterizado por alterações relacionadas ao metabolismo de aminoácidos, metabolismo energético, imunometabolismo, neuroinflamação e interação microbiota–hospedeiro. Os achados reforçam o potencial da saliva como matriz biológica, de coleta simples e não invasiva, para investigação metabolômica da SCZV e ampliam a compreensão das alterações bioquímicas associadas à síndrome.
Palavras-chave (indicar pelo menos três, separadas por ponto e vírgula, utilizando indexadores de acordo com os Descritores em Ciências da Saúde - DeCS): Síndrome Congênita do Zika Vírus; saliva; metabolômica; odontologia; ¹H-RMN; Zika.