Mice with genetic and induced B-cell deficiency as a model for disseminated encephalitozoonosis.

Resumo

Microorganismos eucarióticos, Microsporidia , são patógenos intracelulares obrigatórios pertencentes ao filo Microsporidia e ao reino Fungi, capazes de infectar tanto vertebrados quanto invertebrados. Encephalitozoon E. cuniculi. A imunidade celular desempenha um papel significativo na sobrevivência do parasita . Embora os linfócitos B sejam as células centrais da resposta imune, sendo os principais responsáveis ​​pela produção de anticorpos , eles também podem modular a resposta imune através da produção de citocinas pró-inflamatórias e anti-inflamatórias. Portanto, o papel das células B na microsporidiose requer investigação adicional. hospedeiro infectado por E. cuniculi , e os linfócitos T CD8 + estão envolvidos na morte direcionada das células infectadas, prevenindo assim a disseminação do patógeno [23] , [3] , [4] . Dependendo da via de infecção, uma resposta imune eficiente contra E. cuniculi é mediada por linfócitos T CD4 + , como relatado anteriormente no caso da infecção pela via oral [8] . Os anticorpos produzidos por células B contra E. cuniculi não conferem proteção contra o curso da infecção [13] , [21] As células B desempenham um papel crucial tanto nas respostas imunes inatas quanto adaptativas . Dependendo do patógeno e da via de infecção, os subtipos foliculares ou inatos de células B se diferenciam especificamente de uma maneira que pode ser dependente ou independente das células T. A transferência adotiva de anticorpos para camundongos nude ou SCID não foi suficiente para evitar a morte dos mesmos . Estudos in vitro da resposta imune a microsporídios afirmam a função dos anticorpos na opsonização e no bloqueio da infecção em células não fagocíticas [34] crescimento de E. cuniculi foram atribuídos à presença de macrófagos peritoneais [32] , [9] animais infectados com E. cuniculi [9] , embora os anticorpos tenham permitido o prolongamento da sobrevida de camundongos SCID previamente reconstituídos com CD4 + , infectados por via oral e tratados com anticorpos monoclonais por via intraperitoneal [32] . A resposta normal das células B depende da tirosina quinase de Bruton (Btk), alvo de mutações inativadoras em doenças de imunodeficiência ligadas ao cromossomo X em camundongos (XID) e humanos (XLA) [20] . A XLA, a imunodeficiência mais comum em humanos, é responsável por aproximadamente 85% dos defeitos precoces das células B [10] [20] . A encefalitozoonose disseminada foi descrita em um menino de 4 anos com agamaglobulinemia ligada ao cromossomo X. Ele apresentava pneumonia e sintomas neurológicos, e os esporos do patógeno foram obtidos no líquido cefalorraquidiano, nas fezes e em aspirados dos seios paranasais e brônquicos [40] .Em resposta às interações entre o receptor de células B (BCR) e os antígenos, a ativação da Btk induz uma sinalização celular complexa que resulta na sobrevivência, proliferação e diferenciação das células B, bem como na produção de anticorpos.Os linfócitos B são classificados em células B-1, que se localizam principalmente nas cavidades peritoneal e pleural, e linfócitos B-2, abundantes nos linfonodos, baço e medula óssea [2] , [36] , [37] [15] , [16] [7] , [8] .Além disso, esses dois subtipos celulares diferiram em marcadores de superfície celular , gama de anticorpos, morfologias distintas e funções . Nosso grupo relatou o aumento da suscetibilidade de camundongos XID à encefalitozoonose em comparação com camundongos BALB/c selvagens. A transferência adotiva de células B-1 para camundongos XID facilitou o aumento do número de células do sistema imunológico e maior resistência à infecção pelas vias oral e peritoneal. Também demonstramos a imunossupressão mediada por ciclofosfamida , agravando a suscetibilidade de camundongos BALB/c à encefalitozoonose disseminada e letal . A ciclofosfamida é um agente alquilante que inibe as respostas imunes humoral e celular. Ela tem ampla aplicação como fármaco citotóxico na terapia antitumoral e como imunossupressor em doenças autoimunes e transplantes de órgãos , incluindo a profilaxia da doença do enxerto contra o hospedeiro após transplante alogênico mieloablativo de células T. No entanto, as imunodeficiências que predispõem a essas infecções oportunistas variam significativamente e ocorrem por meio de infecções pelo HIV , tratamento antirrejeição de transplantes, quimioterapia, uso de imunossupressores em doenças autoimunes, imunodeficiência primária, entre outras situações . Para esclarecer o papel das células B, o presente estudo teve como objetivo desenvolver um modelo de encefalitozoonose disseminada e grave em camundongos com imunodeficiência combinada , induzida geneticamente (deficiência de Btk) e farmacologicamente por ciclofosfamida ( Cy ). [22] [18] . Muitos modelos desenvolvidos para estudar a microsporidiose envolvem animais sem células T, especialmente células T CD8+ [5]